概述
该介质的基质为平均粒径90μm的6%高度交联琼脂糖,金属离子螯合配基经共价连接具有良好的稳定性。 螯合配基带有二价的Ni2+,是纯化多数组氨酸标签蛋白的介质。该介质的配基密度经过优化从而保证了高蛋白结合载量和高选择性,而高流速特性使得该介质适合于大规模纯化。
特点
① 相比三价金属离子螯合剂亚氨基二乙酸制成的Ni-IDA-琼脂糖,Ni-NTA-琼脂糖的非特异性吸附明显减少,可让使用者获得更高纯度的目标蛋白;
② 支持变性包涵体蛋白的柱上复性,起到分离、复性同步进行的效果;
③ 可耐受一定浓度的还原试剂(β-巯基乙醇最高可用到20 mM);
④ 琼脂糖基质在pH 2~14范围内保持稳定,可耐受反复在位清洗(CIP);
⑤ 纯化过程中极少的Ni2+渗漏;
⑥ 可以反复使用和再生5~10次。
应用
用于各种表达来源(如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和 哺乳动物细胞等)的组氨酸标签蛋白的纯化。