一、 CRISPR/Cas9技术原理

CRISPR/Cas9Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是最近几年新出现的一种基因组编辑工具,它能够完成RNA导向的DNA识别及编辑。与ZFNTALEN技术相比,CRISPR/Cas9技术更易于操作,具有更强的可扩展性。CRISPR技术使用一段序列特异性向导RNA分子(sequence-specific guide RNAsgRNA)引导高度保守的CRISPR相关基因(Crispr- associated gene, Cas gene, Cas9)编码的核酸内切酶,到靶位点处对DNA序列进行特异性的切割,并引入单个或多个碱基的插入或缺失突变,从而完成基因组的编辑。目前,CRISPR/Cas9系统的高效基因组编辑功能已被应用于多种模式生物,包括拟南芥、烟草、水稻等植物、人、小鼠、斑马鱼、秀丽隐杆线虫及细菌。


二、CRISPR/Cas9载体构建服务

1 实验技术路线及周期

 

技术优势

1Crispr/Cas9基因编辑技术易操作,基因敲除效率高,成本低。

2、本公司有针对不同物种的CRISPR/Cas9载体,可根据客户的实验材料而定。

3本公司使用ClonExpress®技术,无须中间载体,一步将目的片段和载体无缝连接

4、针对客户的目的基因,可一次设计2-3gRNA靶点构建载体,提高基因敲除效率。

服务参数

分项内容

周期(工作日)

价格

植物CRISPR/Cas9载体

10

 


3实验结果提交形式

序号

名称

交付形式

1

项目报告(含实验数据)

Word文档电子版

2

实验过程图片

JPGTIF电子版

3

阳性质粒测序数据

电子版

4

阳性克隆质粒及菌液

菌液≥2 ml

质粒≥20 μl

5

载体图谱和注释信息

Word文档电子版


三、 CRISPR/Cas9载体遗传转化服务

CRISPR/Cas9基因编辑技术能精确的对基因靶点进行切割产生突变,达到沉默基因的目的,这类载体的遗传转化也依托于植物组织培养技术。

1 技术路线和周期

服务参数

  分项内容

周期(工作日)

价格

烟草遗传转化

2-3

 

炼苗移栽(可选)

15

 

检测阳性CAS9植株,靶基因测序扩增

14

 

实验结果交付

序号

名称

交付形式

1

项目报告(含实验数据)

Word文档电子版

2

实验过程图片

JPGTIF电子版

3

测序数据

电子版

4

载体说明书

PDF文档电子版

5

转基因烟草瓶苗或移栽苗

20-40

6

CRISPR/Cas9载体质粒和菌株

菌液≥2 ml

质粒≥20 µl