亚细胞定位服务

亚细胞定位是指某种蛋白或表达产物在细胞内的具体存在部位。蛋白质的亚细胞定位研究对于系统地理解植物形态建成、生长发育和逆境等都是必不可少的环节,同时也是基因组学研究的重要内容。目前使用最多的是通过融合报告基因进行共定位观察,其中报告基因以绿色荧光蛋白应用最为广泛。

亚细胞定位技术流程

2.1基因枪法

1.目的基因与报告基因融合载体构建

2.分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1μm

3.加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液

4.100μL放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10 μL含目的基因和荧光标记蛋白的融合质粒

5.逐步加入40 μL 0.1mol/L亚精胺和100 μL2.5 mol/L CaCl2,振荡混匀

6.基因枪GDS-80轰击时氦气罐的气压为1300psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到基因枪中央,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养

7.使用激光共聚焦显微镜观察。

2.2瞬时转化法

1.目的基因与报告基因融合载体构建

2.离心,收集菌体;

3.配置重悬液;

4.将重悬液注射到4~6叶期烟草叶片中;

5.暗培养24h

6.注射后72h利用激光共聚焦显微镜观察。

服务参数及周期

项目名称

服务周期(工作日)

价格

亚细胞定位

20

 

实验结果提交形式

序号

名称

交付形式

1

项目报告(含实验数据)

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2

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