细胞周期检测

1.1细胞周期检测服务

细胞周期(cell cycle)分为间期与分裂期两个阶段。细胞周期内有两个阶段最为重要:G1SG2M;这两个阶段正处在复杂活跃的分子水平变化的时期,容易受环境条件的影响,如果能够人为的进行调控,将对深入了解生物的生长发育和控制肿瘤生长等有重要意义。

通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0期,S期和G2/M期,获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。

1.2细胞周期检测流程

1.待测样本制成单细胞悬液,然后200g离心5分钟,弃上清。

2.4℃预冷的70%乙醇固定,4℃保存,至少固定12小时。

3.调整细胞浓度为106/mL,取1mL细胞悬液,用PBS洗三次,细胞重悬于1 mL PI染液中,37℃孵育30分钟即可进行流式分析。

1.3服务参数及周期

项目名称

服务周期(工作日)

价格

细胞周期流式检测

10

 

1.4实验结果提交形式

序号

名称

交付形式

1

项目报告(含实验数据)

Word文档电子版

2

图片

JPGTIF电子版

2 细胞凋亡检测

2.1细胞凋亡检测服务

Annexin V是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin VPI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

2.2细胞凋亡检测流程

1.细胞培养,接种6孔板;

2.按指定的方式诱导细胞凋亡;

3.不含EDTA的胰酶消化贴壁细胞并离心收集;

4.重悬细胞,加Annexin V/PI染色;

5.流式细胞仪检测;

6.结果统计分析。

2.3服务参数及周期

项目名称

服务周期(工作日)

价格

细胞凋亡流式检测

10

 

2.4实验结果提交形式

序号

名称

交付形式

1

项目报告(含实验数据)

Word文档电子版

2

图片

JPGTIF电子版