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KM-R-0302 | DNase I 柱上消化试剂盒

货号: KM-R-0302


名称: DNase I 柱上消化试剂盒


规格:  50次

¥450

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任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的GenePure系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜,可以去除绝大多数的DNA污染,所以一般不用进行DNase I 消化。但是对于一些敏感的下游实验,需要去除微量的DNA残留,可以购买本公司DNase I柱上消化试剂盒(RNase free),直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒。

          DNase Buffer -20 保存 去蛋白液PRS常温或者4 保存RNase free DNase -20 保存,避免反复冻融

DNase是非常敏感,易物理损坏变性丧失活性,所以不要漩涡混匀DNase I和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鲜的工作液。DNase I buffer是和RNase-free DNase I配套专门用于柱上消化,一般的10 x DNase buffer 并不能用于膜上的DNase 消化,不能替代。


  1. 简单快速,条件经过优化,一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA

  2. 确保RNase free, 可以保证RNA分子完整性。

  3. 兼容性广,可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化,不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA

  1. 按照正常RNA提取步骤操作,裂解混合物过柱离心完全后(RNA包括残留DNA吸附到离心柱硅胶膜上),加入去蛋白液PRS步骤前按照以下步骤操作。

  2. 取一个新的1.5ml离心管,加入45μl DNase I buffer5μl RNase free DNase I,轻轻吹打混匀成DNase I工作液(处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液)。置冰上备用。

    注:如果残留DNA过多导致消化不完全,可按比例加大使用酶量来提高消化效果(如90μl DNase I buffer10μl RNase free DNase I)。

  3. 向吸附柱AC 中加入350μl去蛋白液PRS12,000 rpm 离心30 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

  4. 向吸附柱AC 中央加入50μl DNase I 工作液,室温(20-30)放置15 分钟。注意直接将工作液滴在膜中央上,不要让工作液滴在O型圈或是离心柱管壁上。

  5. 向吸附柱AC 中加入350μl去蛋白液PRS12,000 rpm 离心30-60 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

  6. 接漂洗液RB步骤等后续步骤。如果是其它公司试剂盒,则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤。