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| 2×SYBR Green qPCR Mix

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名称: 2×SYBR Green qPCR Mix


规格:  200次

¥900

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  • 产品储存:20 ℃ 避光保存至少12个月,使用前充分融解混匀。短期使用可放在4 ℃,避免反复冻融。

    本制品本制品是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。已经将热启动HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTP、特殊稳定剂、优化的反应缓冲液、BSASYBR® Green I等试剂预混成一种适合Real Time PCR反应检测用2×Premix Type试剂,具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。使用时只需加入模板和引物和水,便可在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对目的基因进行准确定量检测,重复性好,可信度高。本品采用全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶,该酶不同于一般Hot-start酶之处在于,一般的Hot-start酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而Hotmaster Taq DNA聚合酶是利用抑制剂通过温度调节方式封闭Hotmaster Taq DNA聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。

  1. 本制品不含参比染料ROX,客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX参比染料,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。

  2. 本制品含SYBR® Green I 强光下易分解,降低敏感度,使用时避免长时间强光照射本制品。

  3. 建议在冰上配制PCR反应液,再放入PCR仪器中扩增。可以提高扩增特异性,减少背景。

  4. 本制品含有4 mM MgCl2(反应体系终浓度是2 mM Mg2+),可用25mM MgCl2 优化Mg2+浓度。

  • 建议PCR条件(2550 μl反应体系为例,反应液配制请在冰上进行

Components

Volume25 μl

Volume50 μl

Final Concentration

2 x SYBR qPCR Mix

12.5μl

25 μl

DNA Template

1 μl

2 μl

as required

Forward Primer (10 μM)

0.5 μl

1 μl

0.2 μM each

Reverse Primer (10 μM)

0.5 μl

1 μl

0.2 μM each

ddH2O to final volume

25 μl

50 μl

Not applicable

 

PCR 循环(二步法)

94 2-3 min

945-10 sec

60 30-34 sec  

Dissociation Stage

 

PCR 循环(三步法)

94 2-3 min

9410-20 sec

55-60 10-20 sec         40 cycles

72 20-30 sec

Dissociation Stage

说明:本制品兼容性强,适用于不同厂家、型号的荧光定量PCR仪,绝大多数情况下使用二步法和三步法均可获得良好效果。