总糖包括还原糖和非还原糖,还原糖是活性糖类物质,可以通过直接化学滴定法进行定量检测,如葡萄糖、麦芽糖等。非还原糖是无活性的糖类物质,可以通过水解等方式生成还原糖,如蔗糖、淀粉等。因此,总糖的测定一般通过水解的方式将食品中的糖类物质完全水解成为还原糖后进行定量检测。总糖与还原糖检测方法主要有滴定法、分光光度法、高效液相色谱法、气相色谱法、旋光法、酶标仪法等。

滴定法是总糖与还原糖较为常用的测定方法之一,主要有直接滴定法、高锰酸钾滴定法、铁氰化钾滴定法等。其中直接滴定法是其中最为常用的方法,需要试剂用量少,检测成本低,操作简便;但要严格控制检测条件,即控制加热强度要在2min内达稳定沸腾,减少氧气对滴定终点判断的影响等。直接滴定法主要是通过将待测试样滴定到已标定的临用时混合的斐林试剂甲液、乙液或碱性酒石酸铜甲液、乙液中,亚甲基蓝为指示剂,由消耗试液体积数计算总糖与还原糖的含量,直接滴定法广泛应用总糖与还原糖的检测中。

分光光度法的原理是将糖类物质水解成还原糖,通过还原糖与显色剂反应生成可在紫外、可见光范围内有吸收峰的物质,通过测定标准物质吸光值与浓度的标准曲线方程,再将试液的吸光值代入曲线方程即可测定还原糖的含量。常用显色剂有:3-5-二硝基水杨酸、蒽酮-硫酸等。其操作简单易行、结果准确度高,重复性好、检测成本低等优点,被广泛应用于各类样品中总糖与还原糖的测定。

高效液相色谱法是根据不同分子结构和相对分子质量的糖类物质与色谱柱填充物的作用力程度的差异,洗脱保留时间不同而将各糖类物质进行分离,并通过特定检测器分别进行定量检测,常用的检测器有示差折光检测器、蒸发光散射检测器、质谱等。高效液相色谱能够一次分别准确测定各糖类物质的含量,如葡萄糖、果糖、木糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖等糖类物质的含量同时测定,具有分离效率高、检测速度快、灵敏度高、结果准确可靠等优点。高效液相色谱法作为实验室中高端的大型仪器设备,为大批量样品检测和多种糖类物质的同时检测,结供便捷高效的方法。

随着检测技术的成熟,糖类物质的检测方法得到推广,使实验人员运用起来更方便得心应手。科米代谢也为您检测提供优质的服务。